ZHEJIANG ZANCHENG LIFE SCIENCES LIMITED
专业从事生产和经营中间体和精细化工品
Chemintel Technology
浙江赞诚生物科技有限公司专注于大健康产业在化学、生物及发酵等领域的发展。主营产品涉及香精香料、饲料及食品添加剂、医药原料,化妆品原料,植物提取等多个系列精细化学品。公司团队专业从事化学品进出口贸易10+年,与国内外一百多家相关企业建立了稳定的合作关系。公司总部位于浙江省杭州市,在印度孟买和荷兰分别设立有办事处。我们一直秉承“工艺技术为核心、产业链稳定为保证”的业务开拓理念,执着于”做受客户称赞的,诚实可靠的,专业的精细化学品供应商“的服务理念,力求为全球市场稳定供应优品质、高性价、广覆盖的好产品。
对产酸相的产物有影响ꎬ这是产酸相产物的限制性因素之一ꎮ5.2碳源对发酵法产丁酸的影响在微生物生长过程中碳源一直是重要的影响因素ꎬ生物发酵产丁酸的量和碳源有着密切的关系ꎬ一般葡萄糖的效果最好ꎬ其次是蔗糖和果糖[23]ꎬ但考虑到成本可以联用蔗糖和丁二酸钠作为复合碳源代替传统的单一碳源培养基[35]ꎬ这样既能节约成本ꎬ又大大的提高了产丁酸的量ꎮ
5.3氮源对发酵法产丁酸的影响氮源分为无机氮源和有机氮源ꎬ二者对不同的微生物菌种的作用不同ꎮ通常无机氮源常用硫酸铵作为氮源ꎻ相比于使用单一氮源ꎬ有机氮源的产丁酸效果比无机氮源的效果更为显著ꎬ其中以酵母膏的效果最好[36]ꎮ5.4底物和终产物对丁酸产量的影响许多代谢途径都会受到它们自身终产物的抑制ꎮ在利用梭状芽孢杆菌发酵产丁酸的过程中ꎬ丁酸、乳酸、乙酸、丁醇、乙醇和丙酮都会影响丁酸的产量[35 ̄36]ꎮ例如丁醇会改变膜的流动性、膜功能和细胞内ATP水平致使丁酸的产量降低ꎬ因此丁酸发酵也受到底物的抑制ꎮ未分解的丁酸通过细菌细胞膜进入胞内并最终被分解ꎬ它影响跨膜pH梯度并减少了微生物生长所需的能量
[36]ꎮ在生产过程中为了使丁酸浓度保持在抑制水平以下ꎬ曾经用高稀释率来降低丁酸浓度ꎬ但是ꎬ这不利于下游产物的纯化ꎬ所以及时移出产物尽可能的降低丁酸浓度是非常重要的ꎮ5.5益生素对发酵法产丁酸的影响益生素是一种含有多种对微生物有益物质的复合型生物制剂ꎬ因为它不会对微生物产生毒杀效应ꎬ且使用不会引起微生物产生抗性ꎬ因此益生素成为一种理想且绿色的可以替代传统抗生素的添加剂[37]ꎮ5.6预处理方法对发酵法产丁酸的影响在微生物发酵时ꎬ为了提高底物的利用率ꎬ常对底物进行预处理ꎮ目前常用的低成本预处理方法主要有加热预处理和化学预处理ꎬ化学预处理又包括酸法预处理和碱法预处理ꎮ
5.6.1加热预处理对发酵法产丁酸的影响加热预处理是常用于厌氧发酵的一种物理预处理手段ꎮ生物细胞一旦被热处理后ꎬ细胞的状态就会发生一定的改变ꎬ例如结合水和蛋白质等会透过膜释放到胞外并水解ꎮ细胞在受到不同的预处理温度加热后ꎬ受损的细胞位置也不一样:当处理温度在45~65°C时ꎬ细胞膜会遭到破坏ꎬ同时核糖体RNA也会降解ꎻ50~70°C时的热预处理将使DNA变性ꎻ65~90°C时细胞壁瓦解导致细胞死亡ꎻ70~95°C高温处理时蛋白质分解成小分子肽段且易溶于水ꎬ成为很好的缓冲剂ꎬ让被处理系统有较好的适应pH变化的能力[38]ꎮ伴随着不同的热处理温度ꎬ细胞在厌氧发酵中所产丁酸的量也会明显不同ꎮ进一步研究热处理时间对细胞厌氧发酵产酸的影响ꎬ在80°C高温下分别进行了15、30、45、60min的丁酸厌氧发酵:当放置时间为15min时发酵产酸量很低ꎬ随着放置时间的逐渐延长ꎬ细胞发酵产酸量明显上升ꎬ当放置时间进一步延长至30或45min时发酵液中丁酸浓度急剧上升ꎬ当放置时间上升至45min后ꎬ酸的产量开始呈现出下降的趋势ꎬ当放置时间为15和60min时发现产丁酸的量非常低
[33]ꎮ热处理时间太短会使得胞内有机物不能被完全破坏溶解且还会影响细胞的破壁从而导致破壁缓慢甚至不彻底ꎬ预处理时间过长则会使有机物质状态发生改变或变质ꎬ因此实验过程热预处理时间可选择30minꎮ5.6.2酸法预处理对发酵法产丁酸的影响酸式预处理是一种化学预处理方法ꎮ在厌氧发酵反应前加入强酸浸泡后的培养基底物ꎬ使细胞通透性增加ꎬ这样胞内生物大分子降解为小分子物质后可释放到胞外供产丁酸微生物利用ꎮ丁酸的厌氧发酵生产pH为4和5时ꎬ发酵液的丁酸浓度明显提高ꎬ但pH为2和3时ꎬ发酵液中丁酸的浓度明显低于pH为4和5时ꎬ原因是细胞处于强酸性条件时细胞中的有机物被较多破坏[33]ꎮ因此用酸对培养基进行预处理可以使细胞的厌氧发酵能力增强ꎬ而且最优条件为pH4~5ꎮ5.6.3碱法预处理对发酵法产丁酸的影响碱法预处理也属于化学预处理方法ꎮ用碱性溶液调节细胞到特定的pHꎬ可使细胞壁上蛋白质的电荷性质发生改变ꎬ从而改变细胞壁的通透性ꎬ释放出生物小分子物质[39]ꎬ提高产丁酸菌利用底物的效率。
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